01 文章背景簡介  

酒精性肝病（alcoholic liver disease，ALD）是由于長期大量飲酒導致的肝臟疾病。初期通常表現(xiàn)為脂肪肝，進而可發(fā)展成酒精性肝炎、肝纖維化、肝硬化甚至肝癌。其主要臨床特征是惡心、嘔吐、黃疸、可有肝臟腫大和壓痛。并可并發(fā)肝功能衰竭和上消化道出血等。嚴重酗酒時可誘發(fā)廣泛肝細胞壞死，甚至肝功能衰竭。酒精性肝病是我國常見的肝臟疾病之一，是肝硬化和肝臟相關(guān)死亡的主要因素，嚴重危害人民健康。

目前，還沒有太好的治療方法可以阻止酗酒者酒精性病變向肝硬化發(fā)展，治療酒精性肝病主要依靠戒酒。越來越多的證據(jù)表明免疫系統(tǒng)在酒精性肝病的病理過程中發(fā)揮了重要作用。在酒精刺激下，先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)被激活，表現(xiàn)為巨噬細胞、中性粒細胞、B細胞和T細胞的浸潤，并誘導促炎細胞因子導致肝臟炎癥。抑制炎癥細胞浸潤可以減輕肝臟炎癥，從而阻止酒精性肝病的發(fā)展。

髓源性抑制細胞（MDSC）由各種未成熟的髓系細胞組成，是免疫抑制網(wǎng)絡(luò)的主要組成部分。根據(jù)Ly6G和Ly6C的相對表達水平，其在嚙齒動物中被人為地分為粒細胞抑制細胞（G－MDSC）和單細胞抑制細胞（M－MDSC）。G－MDSC（CD11b＋Ly6G＋）和M－MDSC（CD11b＋Ly6G－Ly6Chigh）表現(xiàn)出不同的形態(tài)，并通過各種途徑發(fā)揮免疫抑制能力。幾十年前，M－MDSC和G－MDSC都被認為是通過抑制T細胞來幫助癌細胞逃避免疫監(jiān)視，但直到最近，它們在免疫系統(tǒng)中的重要性才被更多人重視。

MDSC會在大多數(shù)炎癥情況下擴增和積累，在不同環(huán)境下產(chǎn)生各種促炎和抗炎細胞因子。M－MDSC和G－MDSC亞群在非癌癥相關(guān)疾病中的作用由特定的炎癥和時機決定。目前對CD11b＋Ly6G＋群的分類仍有爭議，因為G－MDSC和中性粒細胞在細胞表面都有CD11b和Ly6G的表達。由于在形態(tài)、表型和功能上的相似性，在研究它們在炎癥性疾病中的作用時產(chǎn)生混淆。一般來說，具有抑制T細胞活性的CD11b＋Ly6G＋細胞被認為是G－MDSC，但一些具有免疫抑制作用的中性粒細胞也可能包括在內(nèi)。G－MDSC可能是具有免疫抑制功能的中性粒細胞的新表型。因此，這種具有CD11b＋Ly6GhighLy6Cint表達的具有抑制T細胞作用的中性粒細胞，記為G－MDSC樣細胞。研究表明，G－MDSC樣細胞群在應(yīng)對急性酒精攝入時表現(xiàn)出保護作用，但其在慢性酒精性肝病中的作用機制并不清楚。

黃連素是一種從中藥材黃連中提取的生物堿，又叫做小檗堿，具有悠久的使用歷史。黃連素已被廣泛用作保肝藥物，其中大多數(shù)研究集中在CCl4等毒素引起的肝癌、脂肪肝和肝臟纖維化。在動物研究中，已有研究證明黃連素對酗酒引起的肝損傷具有治療作用。但黃連素對急性－慢性飲酒引起的肝臟損傷的治療效果尚不清楚。急性－慢性酒精攝入的模型能較好地模擬酒精性肝病患者的飲酒模式。

2020年，香港大學李嘉誠醫(yī)學院中醫(yī)藥學院的Sha Li等人，在《Clinical and Translational Medicine》雜志（IF2020＝11．492，醫(yī)學一區(qū)）發(fā)表了題為“Modulation of gut microbiota mediates berberine－induced expansion of immuno－suppressive cells to against alcoholic liver disease”的文章。本研究建立了一個酒精喂養(yǎng)動物模型以模擬酒精性肝病患者飲酒模式。鑒于G－MDSC樣細胞群在對抗炎癥中的關(guān)鍵作用，推測黃連素可能介導與G－MDSC樣細胞群相關(guān)的酒精性肝病。本研究系統(tǒng)研究了G－MDSC樣細胞和相關(guān)的免疫細胞的參與及其分布。越來越多的證據(jù)表明，在飲酒后，腸道菌群組成發(fā)生了變化，進一步影響了腸道通透性并導致?lián)p傷。通過藥物調(diào)節(jié)腸道微生物組成可能是治療酒精性肝病的希望。由于黃連素被認為是腸道菌群的有效調(diào)節(jié)劑，因此本文也研究了腸道細菌變化對G－MDSC樣細胞的調(diào)節(jié)作用。

02 所用到的主要方法

（1）動物實驗

（2）體外細胞實驗

（3）流式細胞術(shù)

（4）實時定量PCR

（5）高通量測序

（6）Western blot

03 文章主要內(nèi)容摘要

黃連素是一種從許多中草藥中提取的異喹啉生物堿化合物，已被廣泛用于改善肝功能，但其對酒精性肝�。ˋLD）的保肝作用機制尚不清楚。為了從腸道微生物－免疫系統(tǒng)軸角度探究黃連素對治療酒精性肝病的潛在機制，本文建立了一個模擬酒精性肝病患者飲酒模式的酒精喂養(yǎng)動物模型，通過生化試驗和組織學檢查評估肝功能，用流式細胞儀檢測免疫細胞，收集糞便樣本進行16S rRNA基因擴增測序。本文首次報道了黃連素對急性－慢性酒精性肝損傷有良好的改善作用，并探討了其與腸道微生物－免疫系統(tǒng)軸的相關(guān)機制。黃連素激活了小鼠肝臟中具有免疫抑制功能的細胞群體，即粒細胞樣髓源性抑制細胞（G－MDSC）樣群，從而減輕了酒精引起的肝臟損傷。黃連素可顯著增加血液和肝臟中G－MDSC樣細胞的數(shù)量，并相應(yīng)地減少了細胞毒性T細胞。抑制G－MDSC樣細胞的數(shù)量可顯著減弱黃連素對抗酒精的保護作用。在體外培養(yǎng)的G－MDSCs樣細胞群中，黃連素激活了IL6／STAT3信號，而抑制STAT3的活性則減弱了黃連素對該細胞群的激活作用。此外，黃連素改變了整個腸道微生物群落，主要是增加了嗜黏蛋白阿克曼氏菌的豐度。腸道微生物群的減少消除了黃連素對G－MDSC樣群的誘導作用，并削弱了其對小鼠抗酒精的保肝作用，這表明腸道菌群可能參與介導這種保護群體的擴增。本文深入研究了免疫抑制反應(yīng)在酒精性肝病中的作用，并有助于理解黃連素的藥理作用和作用機制。

       原文標題 : 黃連素的酒精性肝病治療作用與誘導免疫抑制細胞及調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)有關(guān)