目前，免疫治療已經(jīng)成為除手術(shù)、化療和放療之外的抗腫瘤治療的第四大支柱，其中基于T細(xì)胞的免疫治療是一種有效的癌癥治療策略。根據(jù)αβ和γδT細(xì)胞受體（TCR）的表達(dá)，T細(xì)胞可分為兩個主要亞群。αβT細(xì)胞識別非自身的肽抗原，如癌細(xì)胞表達(dá)的抗原。αβT細(xì)胞是適應(yīng)性免疫的效應(yīng)細(xì)胞，這些細(xì)胞以主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制的方式發(fā)揮細(xì)胞毒性。然而，由于MHC分子的丟失，腫瘤細(xì)胞通常抵抗αβT細(xì)胞的攻擊。

相比之下，γδT細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細(xì)胞，這些細(xì)胞以MHC不受限制的方式發(fā)揮作用，使它們成為癌癥免疫治療的理想介質(zhì)。最近的研究表明，γδT細(xì)胞對各種類型的癌細(xì)胞具有強(qiáng)大的細(xì)胞毒性作用。然而，γδT細(xì)胞僅占循環(huán)淋巴細(xì)胞的一小部分，臨床效益并不令人滿意。目前，一些改進(jìn)方法，如雙特異性抗體和CAR－T可能突破γδT細(xì)胞的局限性，提高抗腫瘤效果。

γδT細(xì)胞的激活

人類外周血γδT細(xì)胞主要表達(dá)Vδ2鏈和Vγ9鏈，在識別磷酸化抗原（PAG）時被激活，如（E）－4－羥基－3－甲基－2－烯基焦磷酸鹽（HMBPP）。BTN3A1是BTN3A（CD277）家族的亞型，在PAG激活γδT細(xì)胞中起著不可或缺的作用。BTN3A1在細(xì)胞表面廣泛表達(dá)，由兩個免疫球蛋白樣胞外結(jié)構(gòu)域和一個胞內(nèi)B30．2結(jié)構(gòu)域組成。

一般來說，在生理?xiàng)l件下，PAG的濃度不足以刺激γδT細(xì)胞。然而，由于代謝重編程，腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出PAG生成上調(diào)，這增加了甲羥戊酸途徑的活性。此外，PAG濃度可在藥理學(xué)上增加。用于治療高鈣血癥或癌癥骨轉(zhuǎn)移的含氮雙膦酸鹽，如帕米膦酸鹽（Pam）和唑來膦酸鹽（ZOL），可抑制法尼基二磷酸（FPP）合成酶，這是甲羥戊酸途徑中的限速酶。因此，IPP（FPP上游代謝物）濃度增加，從而激活γδT細(xì)胞。

γδT細(xì)胞與癌細(xì)胞的其它相互作用

γδT細(xì)胞不僅通過γδTCR識別PAG，還通過NKG2D受體識別應(yīng)激相關(guān)抗原，對于自然殺傷細(xì)胞，這種識別方法是不受MHC限制的。MICA是一種刺激NKG2D受體的功能性配體，除MICA外，人類NKG2D配體中的MICB和ULBP1－4與NKG2D受體之間的相互作用對癌細(xì)胞識別和γδT細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性非常重要。

在活化的γδT細(xì)胞中，F(xiàn)as配體（FasL）和TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）的表達(dá)上調(diào)。FasL與CD95（也稱為Fas或APO－1）相互作用， FasL結(jié)合CD95后激活caspase級聯(lián)反應(yīng)，從而啟動癌細(xì)胞凋亡。

TRAIL與五種受體（TRAILRs）相互作用：DR4、DR5、DcR1、DcR2和骨保護(hù)素。死亡受體DR4和DR5含有一個稱為死亡域的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，當(dāng)這些受體與TRAIL結(jié)合時，該區(qū)域使這些受體能夠啟動細(xì)胞毒性信號。因此，腫瘤細(xì)胞中CD95或死亡受體DR4或DR5的上調(diào)可能增強(qiáng)γδT細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性。

腫瘤微環(huán)境與γδT細(xì)胞

一些研究證明了γδT細(xì)胞的可塑性，經(jīng)PAGs激活后，γδT細(xì)胞通過分泌TNF－α和IFN－γ促進(jìn)Th1免疫應(yīng)答。然而，γδT細(xì)胞也可以極化成與Th2細(xì)胞、Th17細(xì)胞或調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）性質(zhì)相似的細(xì)胞。

腫瘤中不僅包括癌細(xì)胞，還包括細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）、基質(zhì)細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞）、血管網(wǎng)絡(luò)和免疫細(xì)胞，如T細(xì)胞和B細(xì)胞、NK細(xì)胞以及各種免疫抑制細(xì)胞，如腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）等，構(gòu)成了腫瘤微環(huán)境（TME）。

TME中含有各種細(xì)胞因子、趨化因子、生長因子、炎癥介質(zhì)和基質(zhì)重塑酶，以促進(jìn)組成TME的細(xì)胞之間的串?dāng)_；這種環(huán)境可以促進(jìn)γδT細(xì)胞極化為Th17或Treg樣細(xì)胞，產(chǎn)生IL－17和TGF－β，有利于癌細(xì)胞增殖。產(chǎn)生IL－17的γδT細(xì)胞誘導(dǎo)血管生成并支持癌癥進(jìn)展， TGF－β可負(fù)性調(diào)節(jié)γδT細(xì)胞。

靶向TME的治療，可以通過激活和改善γδT細(xì)胞的細(xì)胞毒性，增強(qiáng)抗腫瘤作用。在這些TME靶向治療中，針對抑制性免疫檢查點(diǎn)分子的治療性抗體是克服TME免疫抑制效應(yīng)的有效手段。過繼性γδT細(xì)胞與免疫檢查點(diǎn)抑制劑的結(jié)合是提高其細(xì)胞毒性的一種有希望的策略，因?yàn)镻AG刺激的γδT細(xì)胞表達(dá)PD－1，阻斷PD－1可能增強(qiáng)γδT細(xì)胞的抗腫瘤作用。

γδT細(xì)胞治療的新形式

近年來，為了提高γδT細(xì)胞免疫治療的抗腫瘤效果，人們提出了幾種策略。雙特異性抗體的使用顯著提高了細(xì)胞毒性，臨床前研究發(fā)現(xiàn)，EpCAM／CD3雙特異性抗體增強(qiáng)了γδT細(xì)胞介導(dǎo)的肝母細(xì)胞瘤和兒童肝細(xì)胞癌的裂解。在臨床前模型中，用HER2／Vγ9雙特異性抗體體外擴(kuò)增γδT細(xì)胞可顯著降低胰腺癌和結(jié)腸癌的生長。此外，還報(bào)告了一種tribody（HER22xCD16），其包含兩個HER2特異性單鏈片段，與一個靶向γδT細(xì)胞和NK細(xì)胞上表達(dá)的CD16單鏈片段融合，增強(qiáng)了γδT細(xì)胞和NK細(xì)胞介導(dǎo)的HER2表達(dá)腫瘤細(xì)胞的裂解。

嵌合抗原受體轉(zhuǎn)導(dǎo)的γδT細(xì)胞（CAR－γδT）是克服目前治療局限性的另一種新策略。臨床前研究發(fā)現(xiàn)，在體外與陰性的CAR－γδT細(xì)胞相比，帶有CD19特異性CAR－γδT細(xì)胞增強(qiáng)了對CD19＋腫瘤細(xì)胞的殺傷，在小鼠模型中減少了CD19＋白血病異種移植物。

CAR－T細(xì)胞免疫治療存在靶向效應(yīng)問題。Fisher等人設(shè)計(jì)了GD2特異性CAR－γδT細(xì)胞，以限制對正常細(xì)胞的毒性作用。GD2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞表面和其他幾種癌細(xì)胞上過度表達(dá)。在該研究中，γδT細(xì)胞識別腫瘤PAG抗原，然后抗GD2－CAR識別GD2并激活下游信號域以發(fā)揮抗腫瘤作用。因此，與γδTCR結(jié)合的表達(dá)GD2的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞被有效裂解，而與γδTCR結(jié)合的表達(dá)GD2的細(xì)胞沒有受到影響。

目前，一些臨床研究正在進(jìn)行中。CAR－γδT細(xì)胞有望成為一種新型的γδT細(xì)胞免疫療法。

小結(jié)

基于γδT細(xì)胞的免疫治療非常有吸引力，這些細(xì)胞在體外和小鼠模型中對各種類型的癌癥都顯示出強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性作用。然而，臨床試驗(yàn)顯示臨床效益有限。新的方法，包括γδT細(xì)胞和免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合免疫治療，雙特異性抗體和CAR－γδT細(xì)胞都是有望克服目前治療局限性的新策略。TME對γδT細(xì)胞免疫抑制作用的進(jìn)一步研究，以及抗癌藥物聯(lián)合治療、分子靶向藥物、表觀遺傳藥物、雙特異性抗體以及CAR－γδT細(xì)胞的臨床研究，將為未來γδT細(xì)胞免疫治療的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

1．Strategies to Improve the Antitumor Effectof γδT Cell Immunotherapy for Clinical Application． Int J Mol Sci． 2021Aug； 22（16）： 8910．