γδT 細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細(xì)胞，這些細(xì)胞以 MHC 不受限制的方式發(fā)揮作用，使它們成為癌癥免疫治療的理想介質(zhì)，近年來(lái)在過(guò)繼性T細(xì)胞免疫療法中越來(lái)越受歡迎。

T細(xì)胞有兩種類(lèi)型：αβT細(xì)胞和γδT細(xì)胞。前者表達(dá)T細(xì)胞受體（TCR），該受體包含α鏈和β鏈的異二聚體。后者表達(dá)包含γ鏈和δ鏈異二聚體的TCR，通常不表達(dá)共受體CD4和CD8，平均占人類(lèi)外周血T細(xì)胞的4%。γδT細(xì)胞是MHC非依賴(lài)性的，并已被發(fā)現(xiàn)識(shí)別多種配體分子，如BTN家族蛋白（BTN2A1/BTN3A1和BTNL3/BTNL8）、MHC相關(guān)蛋白。γδT細(xì)胞通過(guò)其TCR識(shí)別這些分子，并表達(dá)先天受體，如NKG2D、Toll樣受體（TLRs）和CD16。

γδT細(xì)胞在對(duì)抗感染性和腫瘤疾病中發(fā)揮重要作用，γδT細(xì)胞的免疫反應(yīng)本質(zhì)上偏向于I型免疫，I型免疫對(duì)感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性作用（主要通過(guò)顆粒酶B和穿孔素），并導(dǎo)致IFN-γ產(chǎn)生增加。已有的研究表明，γδT細(xì)胞與癌癥的良好預(yù)后呈正相關(guān)。這進(jìn)一步支持了在癌癥治療中引入γδT細(xì)胞免疫療法。

γδT細(xì)胞免疫治療的開(kāi)發(fā)策略

目前，制藥公司在開(kāi)發(fā)基于γδT細(xì)胞的抗癌療法方面取得了很大進(jìn)展。這些公司正在開(kāi)發(fā)的臨床前和臨床階段γδT細(xì)胞相關(guān)抗癌產(chǎn)品，設(shè)計(jì)的方法更加多樣化。

制藥行業(yè)大多采用了四大類(lèi)基本策略。第一種是不經(jīng)修飾的過(guò)繼療法，在該策略中，研究人員專(zhuān)注于利用效應(yīng)γδT細(xì)胞的天然能力，并利用其不依賴(lài)MHC的性質(zhì)，利用“現(xiàn)成”、安全使用和易于生產(chǎn)的特點(diǎn)。該方法包括利用Vδ2和Vδ1γδT細(xì)胞，重點(diǎn)優(yōu)化擴(kuò)增步驟，例如GammaDelta Therapeutics和PhosphoGam公司的產(chǎn)品。

第二種是修飾后的過(guò)繼療法。將經(jīng)典的CAR結(jié)構(gòu)引入γδT細(xì)胞是這一策略的起點(diǎn)，至少有九家公司使用了典型的CAR-T細(xì)胞技術(shù)。CAR-γδT細(xì)胞的靶標(biāo)可分為兩類(lèi)：一類(lèi)是在腫瘤中高表達(dá)的抗原，如GPC3和間皮素，另一類(lèi)是受體，如NKG2DL和PD-L1。此外，許多公司都設(shè)計(jì)了改良的CAR。一種類(lèi)似于TCR-T細(xì)胞技術(shù)的策略是將選定的抗腫瘤γδTCR移植到αβT細(xì)胞中，如Gadeta；或使用γδTCR結(jié)構(gòu)域修飾CARs，例如Eureka Biotechnology公司。另一種策略結(jié)合了誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）和CAR技術(shù)來(lái)生產(chǎn)現(xiàn)成的CAR-γδT細(xì)胞，如Century Therapeutics和CytoMed Therapeutics生產(chǎn)的細(xì)胞。除了通過(guò)CAR修飾γδT細(xì)胞外，近年來(lái)，CRISPR的基因編輯也被IN8bio和Immatics等公司普遍使用。

第三是基于抗體的策略。ImCheck已使用抗BTN抗體在體內(nèi)刺激Vγ9Vδ2 T細(xì)胞；在他們I/II期臨床試驗(yàn)的早期分析中，ICT01（抗BTN3A抗體）在22名患者隊(duì)列中顯示出36%的疾病控制率。LAVA Therapeutics和Shattuck等幾家公司使用雙特異性抗體來(lái)激活γδT細(xì)胞并賦予其特異性。PureTech使用抗Vδ1抗體來(lái)阻斷Vδ1γδT細(xì)胞。Acepodia將基于抗體的方法與過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移相結(jié)合，其中γδT細(xì)胞被腫瘤特異性抗體化學(xué)修飾。

最后是化學(xué)藥物的使用和對(duì)腫瘤的修飾。美國(guó)基因技術(shù)公司旨在對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行基因修飾，以提高其PAgs水平，并原位激活Vγ9Vδ2 T細(xì)胞。AVM生物技術(shù)公司利用高濃度藥物地塞米松磷酸鹽的抗腫瘤作用涉及γδTCR+NKT細(xì)胞的激活。這種藥物可以單獨(dú)給藥，也可以在CAR-T細(xì)胞治療前作為預(yù)處理劑給藥。

已有的γδT細(xì)胞免疫療法臨床結(jié)果

截至2022年10月，至少有28項(xiàng)γδT細(xì)胞免疫療法研究（37個(gè)隊(duì)列）正在臨床中進(jìn)行，所有這些研究都使用了Vγ9Vδ2 T細(xì)胞。這些研究共包括559名患者，其中有14個(gè)隊(duì)列接受體內(nèi)刺激，23個(gè)隊(duì)列接受過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移。早期的研究通常是單藥治療，后期的研究開(kāi)始將γδT淋巴細(xì)胞治療與其他傳統(tǒng)治療相結(jié)合，通常是化療。此外，81%的隊(duì)列接受γδT細(xì)胞治療是用于治療實(shí)體癌，其中肺癌和腎癌是測(cè)試最多的腫瘤。

在307名可以測(cè)量腫瘤反應(yīng)的患者（來(lái)自27個(gè)隊(duì)列）中，無(wú)論策略如何，客觀(guān)緩解率（ORR）為18%，疾病穩(wěn)定（SD）率為31%。當(dāng)對(duì)每種情況下的患者數(shù)量分別進(jìn)行比較時(shí)，體內(nèi)刺激與ACT以及ACT與ACT+之間顯示出顯著差異，而體內(nèi)刺激與ACT+相似。然而，當(dāng)詳細(xì)檢查結(jié)果時(shí)，發(fā)現(xiàn)對(duì)體內(nèi)刺激治療的最佳反應(yīng)只有PR，最大的貢獻(xiàn)來(lái)自將體內(nèi)刺激與PD-1治療相結(jié)合的研究。相比之下，在接受ACT+治療的20名ORR患者中，有11人獲得了CR。

此外，由于腫瘤類(lèi)型會(huì)對(duì)治療反應(yīng)產(chǎn)生重大影響，因此在這組307名患者中比較了血液癌和實(shí)體癌患者的反應(yīng)。其中，49名患者患有血液學(xué)癌癥，而258名患者患有實(shí)體癌。血液學(xué)癌癥患者中，37%（18名患者）實(shí)現(xiàn)響應(yīng)（合并OR率30.1%），實(shí)體瘤患者中14%（36名患者）實(shí)現(xiàn)響應(yīng)（合并OR率5.6%）。

進(jìn)行中的γδT細(xì)胞臨床研究

截至2022年11月15日，至少有48項(xiàng)γδT細(xì)胞相關(guān)臨床試驗(yàn)在ClinicalTrials上注冊(cè)。在這些試驗(yàn)中，30項(xiàng)（63%）正在進(jìn)行中，其中大多數(shù)是I期試驗(yàn)，旨在測(cè)試使用Vγ9Vδ2 T細(xì)胞治療癌癥的安全性和初步療效。在所有這些試驗(yàn)的發(fā)起者中，中國(guó)和美國(guó)占81%。此外，這些注冊(cè)試驗(yàn)也顯示了在臨床中應(yīng)用γδT細(xì)胞策略的動(dòng)態(tài)演變。

有趣的是，自2017年以來(lái)，γδT細(xì)胞臨床試驗(yàn)的數(shù)量急劇增加。首個(gè)使用修飾γδT細(xì)胞（CAR-T）的臨床試驗(yàn)于2016年在中國(guó)公布，并于2017年在中國(guó)開(kāi)始。從那時(shí)起，又開(kāi)始了10種CAR修飾的γδT細(xì)胞療法，一項(xiàng)基因修飾的研究專(zhuān)注于增加γδT淋巴細(xì)胞的化學(xué)耐藥性（NCT04165941），以及一項(xiàng)應(yīng)用TCR-T細(xì)胞技術(shù)的研究，該技術(shù)將腫瘤細(xì)胞毒性γδTCR轉(zhuǎn)化為αβT細(xì)胞（NCT04688853）。除了直接操縱T細(xì)胞外，Vγ9Vδ2 T細(xì)胞活化抗體的使用，無(wú)論是人源化抗BTN3A抗體（NCT04243499）還是工程化腫瘤-γδTCR雙特異性抗體（NCT05369000，NCT04887259），在過(guò)去兩年中都已成為一種新趨勢(shì)。

在2017年之后的34項(xiàng)過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移試驗(yàn)中，30項(xiàng)明確細(xì)胞起源的臨床試驗(yàn)中有20項(xiàng)使用了異基因γδT細(xì)胞。在觀(guān)察治療的癌癥類(lèi)型時(shí)，2017年之前，γδT細(xì)胞治療致力于治療實(shí)體腫瘤，但在啟動(dòng)CAR-γδT細(xì)胞治療后，情況發(fā)生了變化。目前注冊(cè)的CAR-γδT細(xì)胞治療試驗(yàn)主要測(cè)試其在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的應(yīng)用。白血病和肝癌分別是檢測(cè)最多的血液癌和實(shí)體癌。

小結(jié)

回顧過(guò)去的γδT細(xì)胞免疫治療的臨床結(jié)果可以得出幾個(gè)結(jié)論。首先，γδT細(xì)胞免疫療法在臨床上是一種安全的方法，無(wú)論是體內(nèi)刺激、回輸，還是自體或同種異體回輸。一般來(lái)說(shuō)，比2級(jí)更嚴(yán)重的不良事件與γδT細(xì)胞治療沒(méi)有直接關(guān)系，可以得到充分控制。其次，將γδT細(xì)胞療法與其他常規(guī)療法或體內(nèi)刺激相結(jié)合顯示出有希望的結(jié)果。研究表明放射治療具有刺激性免疫調(diào)節(jié)作用。這種聯(lián)合治療產(chǎn)生的激活的腫瘤微環(huán)境可能有助于再注射的效應(yīng)γδT細(xì)胞在腫瘤內(nèi)有效運(yùn)作。最后，新的方法，包括γδT細(xì)胞和免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合免疫治療，雙特異性抗體和 CAR-γδT 細(xì)胞都是有望克服目前治療局限性的新策略。TME對(duì)γδT 細(xì)胞 免疫抑制作用的進(jìn)一步研究，以及抗癌藥物聯(lián)合治療、分子靶向藥物、表觀(guān)遺傳藥物、雙特異性抗體以及 CAR-γδT 細(xì)胞的臨床研究，將為未來(lái)γδT 細(xì)胞免疫治療的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

1. A close look at current γδ T-cell immunotherapy. Front Immunol. 2023 Mar 31;14:1140623

       原文標(biāo)題 : γδT細(xì)胞免疫療法的最新臨床研究進(jìn)展