迄今為止，與傳統(tǒng)的抗癌治療策略相比，免疫治療被認(rèn)為是最有前景的全身性腫瘤治療方法，在提高治療效果方面發(fā)揮著不可或缺的作用。新興的癌癥免疫療法包括癌癥疫苗、CAR－T細胞治療、細胞因子治療、免疫檢查點抑制劑和腫瘤靶向單克隆抗體。其中，單克隆抗體因其特異性靶向分子的能力，已成為癌癥治療中一種關(guān)鍵和有效的治療方式。然而，由于腫瘤復(fù)雜的疾病發(fā)病機制，針對單一靶點的單克隆抗體往往不足以表現(xiàn)出足夠的治療效果。因此，針對多個靶點的雙特異性抗體（bsAbs）應(yīng)運而生，它的發(fā)展改變了腫瘤免疫治療的領(lǐng)域。

CD47 是一種具有糖基化的跨膜蛋白，在多種惡性腫瘤中表達普遍上調(diào)。CD47／SIRPα軸被認(rèn)為是腫瘤免疫學(xué)中一個新靶點，而CD47在腫瘤發(fā)生中起主要作用，因為其在癌細胞中的增強表達可以避免吞噬作用。目前，一些針對CD47的免疫療法，包括單克隆抗體、CAR－T細胞、ADC都已進入臨床研究階段，這里我們主要總結(jié)了一些針對CD47的bsAb，以及它們的可能機制、安全性和療效。

CD47的結(jié)構(gòu)和功能

CD47的分子量為45－55kDa，屬于免疫球蛋白超家族，是由整合素、G蛋白和膽固醇組成的超分子復(fù)合物。CD47的結(jié)構(gòu)包括與相應(yīng)配體相互作用的胞外可變區(qū)、高疏水性跨膜段形成的跨膜區(qū)和親水羧基端胞內(nèi)區(qū)，CD47 激活后可以介導(dǎo)細胞增殖、遷移、吞噬以及細胞凋亡，免疫穩(wěn)態(tài)和抑制NO信號傳導(dǎo)等一系列過程。CD47的配體包括SIRPα、血小板反應(yīng)蛋白－1（TSP－1）和整合素（αvβ3 和α2β1）。

癌細胞利用 CD47 的“不要吃我”的功能，在表面表達的CD47 水平高于非惡性細胞；大量研究表明，CD47 在不同類型的腫瘤中過度表達。CD47高表達水平與癌癥惡化的治療反應(yīng)和預(yù)后相關(guān)。CD47 的表達被巨噬細胞用來區(qū)分“自我”或“非自我”。CD47及其配體不僅調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，還介導(dǎo)各種病理生理過程，如中性粒細胞趨化和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，并在免疫耐受和T細胞活化中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。

靶向CD47的BsAbs

目前有四種靶向CD47的bsAbs用于治療各種癌癥患者，目前正在臨床上進行評估。

IBI322

IBI322是信達生物研發(fā)的第一個同時抑制PD－1／PD－L1軸和CD47／SIRP－α軸的bsAb，用于治療晚期惡性腫瘤患者。臨床前研究表明IBI322能有效阻斷CD47／SIRP－α相互作用，誘導(dǎo)巨噬細胞吞噬CD47表達的腫瘤細胞。IBI322還有效阻斷PD－1與PD－L1的結(jié)合，并激活CD4＋T淋巴細胞，由于PD－L1在腫瘤細胞中表達，IBI322可以比抗CD47單克隆抗體更有效地選擇性結(jié)合到腫瘤細胞，從而降低與紅細胞上表達的CD47結(jié)合的可能性，從而最終降低與抗CD47抗體相關(guān)的毒性。因此，IBI322具有更強的抗腫瘤活性和更高的安全性。

臨床前研究結(jié)果表明，IBI322在體內(nèi)的療效、腫瘤分布和安全性均高于抗CD47單克隆抗體。與兩種單克隆抗體組合療法相比，雙特異性抗體可為患者提供成本更低的解決方案。因此，抗CD47／PD－L1 bsAb的開發(fā)將為患者提供一種新穎、全面、有效和節(jié)省成本的選擇，IBI322有可能使更多有需要的患者受益。IBI322目前正在中國（NCT04328831）和美國（NCT04338659）進行I期劑量遞增試驗，目前沒有臨床數(shù)據(jù)報告。在中國，CIBI322A101是一項1a／1b期臨床研究，旨在評估IBI322治療晚期惡性腫瘤的療效。1b期研究將用于評估IBI322對肺癌、宮頸癌、食管癌、頭頸部鱗狀細胞癌和肝癌的療效。

HX009

HX009是由杭州翰思生物醫(yī)藥有限公司（HanxBio）開發(fā)的抗PD－1／CD47的 bsAb，用于治療晚期實體瘤患者，包括胃癌、結(jié)直腸癌和肝癌。它由抗PD－1 的IgG4亞型的單抗和SIRPα的胞外結(jié)構(gòu)域（ECD）組成，通過同時激活先天性和獲得性免疫反應(yīng)來抑制腫瘤免疫逃逸并通過阻斷免疫檢查點釋放免疫抑制，從而實現(xiàn)協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)。

這種抗體－受體融合形式可以利用天然配體代替抗體來節(jié)省時間和成本。然而，由于受體部分的穩(wěn)定性相對較低，抗體－受體融合蛋白的穩(wěn)定性可能低于基于兩種單克隆抗體的BSAb。目前，HX009正在晚期實體瘤患者中進行I期臨床試驗（NCT04097769）。到目前為止，還沒有關(guān)于HX009的安全性和有效性的臨床數(shù)據(jù)報告。

IMM0306

IMM0306由上海ImmuneOnco生物制藥有限公司開發(fā)，是一種雙特異性重組抗體受體融合蛋白。它的設(shè)計是針對B細胞上的CD47和CD20，但避免與人類紅細胞結(jié)合。IMM0306通過激活巨噬細胞的吞噬能力并通過腫瘤抗原呈遞觸發(fā)抗原特異性T細胞，將成為未來癌癥免疫治療研究的新熱點。

體外研究表明，IMM0306結(jié)合CD47和CD20，其親和力比單個靶向分子低3－8倍。然而，它對CD47陽性靶細胞具有更強的促吞噬活性，甚至具有比利妥昔單抗更強的ADCC活性。有趣的是，IMM0306對人類紅細胞完全沒有結(jié)合活性。用IMM0306治療植入腫瘤的SCID小鼠可顯著抑制腫瘤生長， 8只小鼠中有5只的腫瘤細胞被清除，這比利妥昔單抗更有效。此外，體內(nèi)研究表明IMM0306不與人紅細胞結(jié)合，也不誘導(dǎo)T細胞凋亡。在低劑量（1．5mg／kg）下就可清除淋巴瘤，在安全性和臨床開發(fā)方面顯示出明顯優(yōu)勢。對非人靈長類動物的臨床前研究表明，不同劑量的單次和多次給藥后，具有良好的藥代動力學(xué)特征，沒有明顯的血液毒性。

IMM0306目前正在進行I期臨床試驗（NCT04746131），以評估在B細胞非霍奇金淋巴瘤患者中的安全性和療效。同時，在中國進行的IMM03061期劑量遞增試驗（IND No．CTR20192612）正在難治性或復(fù)發(fā)性CD20陽性B細胞非霍奇金淋巴瘤患者中進行評估。到目前為止，還沒有關(guān)于IMM0306的臨床數(shù)據(jù)報告。

TG－1801

TG－1801是抗CD47／CD19的 bsAb，該bsAb通過低親和力CD47靶向抗體和高親和力抗CD19抗體的組合，以確保bsAb僅在共表達兩種抗原的腫瘤細胞上阻斷CD47。它具有增強的Fc介導(dǎo)的吞噬作用。TG－1801設(shè)計用于選擇性靶向CD19＋B細胞上的CD47，而保留紅細胞和血小板。它可以避免靶外毒性，代表一種新的免疫治療策略，有可能與目前正在研發(fā)的藥物產(chǎn)生協(xié)同或互補作用。此外，CD47和CD19的聯(lián)合靶向增強了預(yù)期的安全性，并通過保留其IgG1 Fc區(qū)的ADCC作用，從而提供了抗腫瘤活性的第二種機制。

因此，TG－1801可能在改善B細胞惡性腫瘤患者的預(yù)后方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。同時，TG治療首次證明TG－1801與ublituximab（抗CD20單克隆抗體）和umbralisib（PI3K－δ／酪蛋白激酶－1?抑制劑）具有協(xié)同作用，協(xié)同腫瘤生長抑制似乎是通過免疫效應(yīng)細胞浸潤增加介導(dǎo)的。目前，TG－1801正在進行I期臨床試驗（NCT03804996），以評估其治療B細胞淋巴瘤患者的安全性和有效性。到目前為止，還沒有關(guān)于TG－1801的臨床數(shù)據(jù)報道。

SL－172154

由Shattuck Labs Inc．開發(fā)的SL－172154是一種新型融合蛋白，由人SIRPα和CD40L（SIRPα－Fc－CD40L）通過人Fc連接而成。它的目的是阻斷CD47免疫檢查點，同時通過檢查點阻斷和TNF激活雙重機制激活CD40通路。已有的研究發(fā)現(xiàn)，與單獨或聯(lián)合使用針對CD40和CD47的單抗相比，SL－172154顯著改善了原發(fā)性和繼發(fā)性腫瘤的清除，類似于PD－1－Fc－OX40L。值得注意的是，SL－172154刺激食蟹猴多種血清細胞因子的劑量依賴性升高和CD40＋B細胞著邊，而不引起溶血或血小板減少。

目前，SL－172154正在卵巢癌患者的1期試驗（NCT04406623）中進行評估。到目前為止，還沒有關(guān)于SL－172154的臨床數(shù)據(jù)報告。

CD47靶向BsAbs的安全性和未來方向

由于CD47的廣泛表達，抗CD47抗體作為抗癌藥物的潛在問題可能會產(chǎn)生脫靶效應(yīng)，如貧血。CD47是紅細胞更新的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，因此，有人擔(dān)心CD47靶向抗體會加速紅細胞清除并導(dǎo)致溶血性貧血。對于臨床前研究中以CD47為靶向的bsAbs，人們正在使用各種方法試圖減輕這種靶向細胞毒性。例如，NHP研究表明，第二個劑量的IBI322會導(dǎo)致紅細胞和紅細胞壓積指數(shù)的額外下降。雖然兩組的紅細胞計數(shù)在第11天開始恢復(fù)，但與第15天的Hu5F9組相比，IBI322治療組的紅細胞計數(shù)顯著增加。有理由期望IBI322能夠減少患者CD47靶向介導(dǎo)的副作用。

值得注意的是，CD47靶向制劑（即Hu5F9－G4和TTI－621）可導(dǎo)致人的急性貧血和血小板減少，這也可能取決于Fc的形式。鑒于抗CD47抗體和SIRPα－Fc融合蛋白會引起這種毒性，而高親和力SIRPα單體不會引起這種毒性，因此抗CD47抗體的毒性似乎是Fc依賴性的。進一步的研究應(yīng)考慮優(yōu)化抗CD47 bsAbs的結(jié)構(gòu)，以避免毒性。

此外，正常組織上CD47的表達可能會阻止抗CD47治療性抗體在體內(nèi)到達腫瘤細胞靶點，這也給抗CD47的BSAb帶來了問題。一種規(guī)避此問題的策略是降低bsAbs對CD47的親和力，但保留阻斷CD47－SIRPα相互作用的能力，并提高對第二種腫瘤抗原的親和力。在未來的研究中，應(yīng)該考慮更多針對腫瘤細胞的CD47及其配體的策略。

當(dāng)巨噬細胞或樹突狀細胞通過CD47阻斷對癌細胞進行吞噬時，這些吞噬細胞可能將腫瘤抗原呈遞給T細胞以誘導(dǎo)抗腫瘤T細胞反應(yīng)。因此，與T細胞檢查點抑制劑結(jié)合的方案可能進一步增強T細胞反應(yīng)并提高療效。

小結(jié)

總之，在抗CD47 bsAbs開發(fā)過程中必須設(shè)置兩個排除條件：1）紅細胞結(jié)合和紅細胞凝集誘導(dǎo)；2） 誘導(dǎo)T淋巴細胞凋亡。如果不排除上述因素，就很難取得臨床成功。目前，以CD47為靶點的臨床試驗大多處于I期臨床試驗階段，主要針對血液腫瘤，其在實體瘤中的價值尚待驗證。期待更廣泛和創(chuàng)新地設(shè)計用于CD47 bsAbs的免疫治療，從而促進其有效性，并減少與免疫相關(guān)的不良反應(yīng)，為更多的患者帶來福音。

參考文獻：

1．Potential Role ofCD47－Directed Bispecific Antibodies in Cancer Immunotherapy． Front Immunol． 2021；12： 686031．